Pewarnaan Gram: Perbezaan antara semakan

Kandungan dihapus Kandungan ditambah
Hakimi97 (bincang | sumb.)
 
Hakimi97 (bincang | sumb.)
Baris 30:
Ion iodida ({{chem|I|-}} atau {{chem|I|3|-}}) akan berinteraksi dengan {{chem|CV|+}} dan membentuk kompleks besar kristal ungu dan iodin (CV–I) dalam dan luar lapisan sel. Iodin seringkali merujuk kepada [[mordan]], tetapi merupakan agen perangkap yang mengelakkan penyingkiran kompleks CV–I dan, oleh itu, mewarnakan sel.<ref name="Stainsfile - Trapping Agents">{{cite web|url=http://stainsfile.info/StainsFile/theory/notmrdnt.htm|title=StainsFile - Stain theory - What a mordant is not|date=|work=stainsfile.info|accessdate=9 March 2016}}</ref>
 
Apabila penyahwarna seperti alkohol atau aseton ditambah, ia akan berinteraksi dengan lipid-lipid pada membran sel.<ref>http://www.ukm.my/penerbit/mikrobiologi.pdf</ref> Sel bergram negatif akan menghilangkan membran luaran lipopolisakarida, dan lapisan dalaman peptidoglikan didedahkan. Kebanyakan kompleks CV–I telah dibasuh keluar dari sel bergram negatif bersama-sama membran luarannya.<ref>http://www.ukm.my/penerbit/mikrobiologi.pdf</ref> Secara jelas perbezaannya, sel bergram negatif dinyahhidratkan selepas pembasuhan dengan etanol. Kompleks besar CV–I complexes terperangkap dalam sel bergram positif disebabkan sifat semulajadi peptidoglikan yang berlapis-lapisan.<ref>http://www.ukm.my/penerbit/mikrobiologi.pdf</ref> Langkah penyahwarnaan adalah merupakan langkah yang sangat genting dan mesti dikira masanya dengan tepat; pewarna kristal ungu akan dibuang dari kedua-dua sel bergram positif dan negatif sekiranya agen penyahwarnaan dibiarkan terlampau lama (hanya dalam beberapa saat sahaja).<ref>http://www.ukm.my/penerbit/mikrobiologi.pdf</ref>
 
Selepas penyahwarnaan, sel bergram positif masih kekal warna ungunya manakala sel bergram negatif akan kehilangan warna ungunya. Pewarna balas, yang selalunya safranin atau fuksin asas yang bercas positif, akhir sekali akan dikenakan kepada apusan untuk memberikan bakteria bergram negatif warna merah atau merah jambu.<ref name="Beveridge_and_Davies_1983">{{cite journal |author1=Beveridge T.J. |author2=Davies J.A. |title=Cellular responses of Bacillus subtilis and Escherichia coli to the Gram stain |journal=Journal of Bacteriology |volume=156 |issue=2 |pages=846–58 |date=November 1983 |pmid=6195148 |pmc=217903 |doi= |url=http://jb.asm.org/cgi/pmidlookup?view=long&pmid=6195148}}</ref><ref name="Davies_et_al_1983">{{cite journal |author1=Davies J.A. |author2=Anderson G.K. |author3=Beveridge T.J. |author4=Clark H.C. |title=Chemical mechanism of the Gram stain and synthesis of a new electron-opaque marker for electron microscopy, which replaces the iodine mordant of the stain |journal=Journal of Bacteriology |volume=156 |issue=2 |pages=837–845 |date=November 1983 |pmid=6195147 |pmc=217902 |doi= |url=http://jb.asm.org/cgi/pmidlookup?view=long&pmid=6195147}}</ref>