Pewarnaan Gram: Perbezaan antara semakan

'''Pewarnaan Gram''' atau '''pewarna Gram''', juga dikenali sebagai '''kaedah Gram''', merupakan satu kaedah [[pewarnaan]] yang digunakan untuk membezakan speciesspesies [[bakteria]] kepada dua kumpulan terbesar ([[Bakteria gram positif|gram positif]] dan [[BakkteriaBakteria gram negatif|gram negatif]]). Nama kaedah ini berasal dari seorang [[pakar bakteriologi]] Denmark yang membangunkan teknik ini, iaitu [[Hans Christian Gram]], yang membangunkan teknik ini.

Pewarnaan gram membezakan bakteria melalui sifat kimia dan fizikal [[dinding sel]] bakteria melalui pengesanan [[peptidoglikan]], yang wujud dalam dinding sel bagiuntuk bakteria bergram positif. <ref name=Bergey_1994>{{cite book|author1=John G. Holt|author2=Noel R. Krieg|author3=Peter H.A. Sneath|author4=James T. Staley|author5=Stanley T. Williams|title=Bergey's Manual of Determinative Bacteriology|edition=9th|publisher=Lippincott Williams & Wilkins|year=1994|page=11|isbn=0-683-00603-7}}</ref> Bakteria gram positif mengekalkan [[kristal ungu|pewarna kristal ungu]], yang menyebabkan bakteria itu berwarna ungu lembayung, dantetapi berlaku sebaliknya bagi bakteria gram negatif. Selepas dibasuhkan, pewarna balas ditambahkan (kebiasaannya [[safranin]] atau [[karbol fuksin]]) yang akan mewarnakan bakteria gram negatif menjadi merah jambu. Perlu diingatkan bahawa kedua-dua bakteria gram positif dan negatif meresap pewarna balas. Namun, pewarna balas tidak kelihatan pada bakteria gram positif kerana warna kristal ungu yang lebih gelap menutup warna merah jambu itu.

Pewarnaan Gram hampir selalusetiap merupakankali dijadikan sebagai langkah pertama untuk identifikasi awal bagi sesuatu bakteria. Walaupun pewarnaan Gram adalah alat diagnostik yang berharga di dalam persekitaran klinikal dan penyelidikan, tidak semua bakteria boleh diklasifikasikan menggunakan teknik ini secara muktamad. Maka, ia menyebabkan terbentuknya kumpulan yang ''dikenalpasti oleh gram'' dan ''tidak ditentukan oleh gram''.

Kaedah ini dinamakan sempena seorang ahli sains [[Denmark]], [[Hans Christian Gram]] (1853–1938), yang menghasilkan teknik ini apabila bekerja dengan [[Carl Friedländer]] di rumah mayat sebuah hospital bandar di [[Berlin]] pada tahun 1884. Gram mencipta teknik beliau bukanbukannya bertujuan untuk membezakan satu jenis bakteria dari yang lain, tetapi hanya untuk membuat bakteria lebih kelihatan dalam keratan tisu paru-paru yang berwarna.<ref>{{Cite journal|last=Austrian|first=R.|year=1960|title=The Gram stain and the etiology of lobar pneumonia, an historical note|journal=Bacteriological Reviews|volume=24|issue=3|pages=261–265|pmid=13685217|pmc=441053}}</ref> Beliau menerbitkan kaedah beliau pada tahun 1884, dan dimasukkan ke dalam laporan singkatnya dengan pemerhatian bahawa [[basilus]] [[tifus]] tidak berupaya mengekalkan pewarna.<ref name=Gram_1884>{{Cite journal |authorlink = Hans Christian Gram |last = Gram |first = H.C. |title = Über die isolierte Färbung der Schizomyceten in Schnitt- und Trockenpräparaten |journal = Fortschritte der Medizin |language=German |year = 1884 |volume = 2 |pages = 185–189}}.<br>English translation in: {{Cite book|last=Brock|first=T.D.|year=1999|title=Milestones in Microbiology 1546–1940|edition=2|publisher=ASM Press|place= |pages=215–218|isbn=1-55581-142-6|url=https://books.google.com/?id=q5JHcs8w21gC&lpg=PP1&dq=Milestones%20in%20Microbiology&pg=PA215#v=onepage&q}}<br/>Translation is also at: {{Cite journal|url=http://www.hoslink.com/pathology/lab_general/history2.htm#gram|last=Brock|first=T.D.|title=Pioneers in Medical Laboratory Science: Christian Gram 1884|publisher=Hoslink|accessdate=2010-07-27}}</ref>

Pewarnaan Gram merupakan satu teknik [[makmal]] [[bacteriologibakteriologi]]<ref name=Sherris>{{cite book |author = Ryan K.J., Ray C.G. (editors) |title = Sherris Medical Microbiology |pages = 232f |edition = 4th |publisher = McGraw Hill |year = 2004 |isbn= 0838585299 }}{{full citation needed|date=March 2016}}</ref> yang digunakan untuk membezakan spesies [[bacteriabakteria]] kepada dua kumpulan besar ([[gram positif]] dan [[gram negatif]]) berdasarkan pada ciri-ciri yang ditunjukkan oleh [[dinding sel]].<ref name=Madigan_2004>{{cite book |last = Madigan |first = M.T. |author2=Martinko J. |author3=Parker J. |title = Brock Biology of Microorganisms |edition = 10th |publisher = Lippincott Williams & Wilkins |year = 2004 |isbn = 0-13-066271-2 }}{{full citation needed|date=March 2016}}</ref>{{page needed|date=March 2016}} Pewarnaan gram tidak digunakan untuk mengklasifikasi [[arkea]], dulu dikenali sebagai arkeabakteria, kerana organisma tersebut menghasilkan pelbagai respons yang jauh berbeza yangdan tidak mengikuti [[filogenetik|kumpulan-kumpulan filogenetik]]nya.<ref>{{cite journal |author=Beveridge T.J. |title=Use of the Gram stain in microbiology |journal=Biotechnic & Histochemistry |volume=76 |issue=3 |pages=111–118 |year=2001 |pmid=11475313 |doi=10.1080/714028139}}</ref>

Pewarnaan Gram ini bukanlah alatan yang sempurna untuk diagnosis, pengecaman, ataumahupun penentuan filogenifilogenik, malahan ianya mempunyai penggunaan yang sangat terhad dalam [[mikrobiologi persekitaran]] Ia digunakan secara utamanya untuk membuat pengenalan awal morfologi atau untuk menentukan bahawa terdapatterdapatnya sebilangan besar bakteria di dalam spesimen klinikal. Ia tidak dapat mengenal pasti bakteria ke peringkat spesies, dan bagidalam kebanyakan situasi perubatan, ia tidak boleh digunakan sebagai kaedah tunggal untuk mengidentifikasi bakteria. Di makmal mikrobiologi klinikal, ia digunakan dalam kombinasi dengan teknik-teknik tradisional dan molekul yang lain untuk mengenal pasti bakteria. Sesetengah organisma adalah gram-ubah (bermakna mereka mungkin menyerap warna sama ada negatif atau positif); ada yang tidak berwarna dan tidak kelihatan dengan apa jua pewarna yang digunakan dalam teknik Gram. Dalam makmal mikrobiologi alam sekitar atau makmal molekul moden, kebanyakan identifikasi dilakukan dengan menggunakan urutanturutan genetik dan teknik molekul lain, yang jauh lebih spesifik dan bermaklumat daripada pewarnaan pembezaan.

Bakteria gram positif mempunyai dinding sel berbentuk jaringan halus yang tebal dan diperbuat daripada [[peptidoglikan]] (50–60% daripada lapisan yang membungkus sel), dan hasilnya dinding ini diwarnakan ungu oleh kristal ungu, manakala bakteria gram negatif mempunyai lapisan yang jauh lebih nipis (hanya sebanyak 10% daripada lapisan yang membungkus sel), maka tidak dapat mengekalkan warna ungu sebaliknya diwarnabalik dengan safranin.

==ReferencesRujukan==

==ExternalPautan linksLuar==